Нозематоз Опции

[Основатель]

Нозематоз — болезнь пчелиных семей, вызывающая их ослабление и гибель вследствие массового вымирания взрослых пчёл и маток. Возбудитель болезни — внутриклеточный паразит эпителиальных клеток средней кишки. Во внешних условиях нозема сохраняется в виде спор. Пчёлы поражаются при поедании мёда и чистке ячеек, загрязнённых спорами нозема. Развитию болезни способствуют потребление падевого мёда и длительная зимовка пчёл. Нозематоз наблюдается в конце зимы и весной, сопровождается поносом и гибелью пчёл. У больных пчёл средняя кишка беловатого цвета без складчатости.
Профилактика и меры борьбы: семьям предоставляют ранний очистительный облёт. Падевый мёд заменяют цветочным или сахарным сиропом. Проводят осеннее наращивание для обеспечения семей молодыми пчёлами. Больные семьи пересаживают в продезинфицированные ульи на сокращённые и хорошо утеплённые гнёзда. Для лечения используют фумагиллин ДЦГ. В 1 л охлаждённого до 30 С сахарного сиропа растворяют 50—100 мг фумагиллнна (в зависимости от степени поражения). Больным семьям лечебный сироп дают весной 2— 4 раза с одно-двухнедельным перерывом из расчёта 200 мл на семью. Фумагиллин можно давать в форме сахарно-молочно-дрожжевой пасты. 1 кг сахарного песка нагревают в 180 мл свежего молока до полного растворения сахара; 100 г дрожжей и 20 г сахарного песка растирают до получения сметанообразной массы. Дрожжевую массу смешивают с приготовленным на молоке сахарным сиропом и доводят до кипения. Полученную пасту охлаждают до 40 °С, в неё добавляют 1,6 г фумагнллина, растворённого в 20 мл тёплого молока. Пасту раскладывают по 0,5 кг в полиэтиленовые мешочки и по одному мешочку кладут в каждый улей сверху рамок под холстик. Пасту дают 4—5 раз через каждые 5—7 дней.

[volmar_georg]

Давненько не заходил на этот раздел , по новой его просмотрел, но здесь дискуссия идет про Назему апис, а меня сильно подкосила Нозема церана.

На желтом полно ругани про церану, а толком ничего. Решил сделать небольшой обзор по церане и методам борьбы с ней. Может кому-то окажется полезным. Будут добавления.

Краткий обзор биологии развития микроспоридии Nosema ceranae и возможные меры борьбы с ней

Nosema ceranae — облигатный внутриклеточный паразит пчел, относящийся к микроспоридиям (группа одноклеточных организмов, родственных грибам). Впервые вид был описан в 1996 году у китайской восковой пчелы Apis cerana и в настоящее время считается инфекционным для представителей таксонов безжалых пчел (Meliponini), настоящих ос (Vespidae) и некоторых видов шмелей и пчел, включая все виды рода Apis и подвиды медоносной пчелы A. mellifera (Plischuk S ea, 2009; Fürst MA ea, 2014; Porrini MP ea, 2017; Martín-Hernández R ea, 2018). Среди видов Apis в Ю-В Азии паразит N. ceranae распространен неравномерно (22% у Apis cerana, 38% у A. dorsata, 45% у A. florea, 78% у A. mellifera) (Chaimanee V ea, 2010).
Единственной стадией жизненного цикла микроспоридий, способной существовать вне клетки хозяина, являются микроскопические споры около 4 мкм длиной, имеющие уникальное строение. В споре под слоем защитных оболочек (хитиновой и гликопротеиновой) находятся зародыш (спороплазма) и сложно организованный аппарат экструзии, осуществляющий внедрение (проникновение) инвазионного начала в клетку хозяина. Характерной чертой спор микроспоридий служит спирально уложенная под оболочкой полярная трубка. При экструзии споры полярная трубка выбрасывается наружу и пробивает мембрану инфицируемой клетки. По каналу полярной трубки в клетку хозяина выбрасывается спороплазма (Тимофеев СА и др, 2016, 2023).
Споры попадают в организм пчелы с пищей, а также, вероятно, при контактном взаимодействии с другими зараженными пчелами. В средней кишке насекомого, защищенной лишь перитрофической мембраной, происходит внедрение зародыша (спороплазмы) паразита в клетку эпителия с помощью сложно организованного аппарата экструзии споры. Внутри клетки хозяина спороплазма превращается в меронт, и после нескольких циклов деления начинается процесс формирования новых спор, которые выводятся из зараженных клеток в просвет кишечника при разрушении энтероцитов и служат источником заражения других клеток того же насекомого или других особей.
Цикл развития паразита:
Спора → спороплазма (зародыш) → меронт (пролиферативная стадия, размножается бинарным или множественным делением) → споронты (ядра споронтов претерпевают от одного до нескольких делений) → спорогональные плазмодии → споробласты → споры

Обнаружение в клетках кишечного эпителия пчел пустых оболочек спор N. ceranae, не содержащих зародыша паразита на 4-й день после заражения, также может свидетельствовать о том, что экструзия спор и заражение соседних клеток кишечника насекомого проходит внутри зараженной клетки (Higes M ea, 2007, 2009).

Вертикальная трансмиссия паразита также возможна, поскольку споры N. ceranae обнаруживались в клетках яичников зараженных маток (Alaux C ea, 2011; Traver BE ea, 2012). Заражение этих клеток обычно происходит при контакте с инфицированными рабочими пчелами (Higes M ea, 2009), таким же образом заражаются трутни (Traver BE, Fell RD, 2011). Считается, что в природных и хозяйственных ульях заражаются только взрослые особи пчел, однако в лабораторных условиях было показано развитие нозематоза у предкуколок, зараженных N. ceranae, на стадии 3-суточной личинки (Eiri DM ea, 2015).

Несмотря на то, что N. ceranae, кроме кишечника, была обнаружена в разных органах рабочих пчел (Chen YP ea, 2009; Copley TR, Jabaji SH, 2012), их заражение никогда не было доказано на гистологическом уровне. Однако есть основания предполагать, что описанные выше результаты были получены из-за загрязнения проб тканей спорами паразита из-за несовершенства методик препарирования или разрушения кишечника насекомого на поздней стадии заражения. То есть, скорее всего, кишечник служит единственным органом, в котором происходит развитие N. ceranae (Higes M ea, 2020). При этом развитие паразита происходит только в энтероцитах, но не в стволовых клетках, необходимых для возобновления кишечного эпителия (Panek J ea, 2018).

Строение эпителия (в работе)

Зараженные клетки эпителия демонстрируют признаки деградации. Перитрофическая мембрана исчезает полностью или значительно фрагментируется. В нижележащем участке щеточной каймы иногда наблюдается разрыв клеточной плазматической мембраны (Dussaubat CJ ea, 2012).
Интересно, что доступность свежей пыльцы в течении сезона никак не влияла на развитие паразита (García-Palencia P ea, 2010)

Мышечный слой (в работе)

Воздействие на метаболизм клетки хозяина и его специфичная перенастройка для увеличения доступности питательных веществ и энергетических ресурсов для паразита — характерная черта паразитизма микроспоридий. Уникальная особенность микроспоридий заключается в том, что в силу внукриклеточного паразитизма они лишены собственных митохондрий и не способны синтезировать АТФ (аденозинтрифосфорная кислота – необходимый элемент многих важнейших метаболических реакций, в том числе гликолиза). Но они приобрели способность использовать митохондрии клеток хозяина за счет концентрации их вокруг паразита и отбора АТФ хозяина. В этом паразиту помогают специальные белки переносчики АТФ. У N. ceranae их четыре, у N. apis – два, в результате N. ceranae в два раза сильнее ослабляет хозяина (Han B ea, 2017, 2019, 2020; He Q ea, 2019; Timofeev S ea, 2020; Huang Q ea, 2021). В результате паразит способен самостоятельно использовать основной запасной дисахарид трегалозу и гликоген хозяина, что в конечном итоге приводит к некрозу, гибели клетки.

N. ceranae также специфично воздействует на защитные реакции хозяина на клеточном уровне. Зараженные клетки кишечника могут подвергаться апоптозу (преждевременной смерти) до того, как паразит успевает завершить полный цикл развития. Паразит N. ceranae, по-видимому, способен блокировать этот процесс, о чем свидетельствует увеличение транскрипции различных ингибиторов апоптоза в зараженных клетках (Dussaubat CJ ea, 2012; Aufauvre J ea, 2014; Martín-Hernández R ea, 2017).

Несмотря на то, что инфицированные пчелы по-прежнему потребляют пищу, они, по-видимому, не могут утилизировать количество потребляемых углеводов и белков и в результате большинство из них используется патогеном для завершения жизненного цикла. С этим связана и деградация у пчел-кормилиц гипофарингиальных желез, производящих секрет для кормления личинок, и обеднение самого секрета (Mayack C, Naug D, 2013; Vidau C ea, 2014).
Кульминация этих эффектов в конечном итоге приводит к быстрому ослаблению пчел и их гибели вне улья. Скорость этого процесса зависит от уровня инфицированности семьи пчел.

Цикл развития спор N. ceranae и N. apis при 33 градусах завершается за 72-96 часов, но уже при 37 градусах занимает 5-7 дней. При этом N. ceranae сохраняет вирулентность, а у N. apis резко понижается. Это свидетельствует, что N. ceranae является эвритермным видом, а N. apis - стенотермным (Malone LA ea, 1995, 2001; Martín-Hernández R ea, 2009; Higes M ea, 2010; Gisder S ea, 2011)

Среди семей с резким падением численности пчел в Испании в 95% случаев обнаружен паразит N. ceranae (Higes M ea, 2010). Во Франции при экспериментальном заражении пчел наблюдалась гибель 10% и 50% пчел через 10 и 20 дней после заражения соответственно (Alaux C ea, 2010; Vidau C ea, 2011), а в Испании 100% гибель пчел уже через 8 дней после заражения (Higes M ea, 2007), что, по-видимому, могло зависеть от условий опытов, начальной дозы паразита или его вирулентности. Для проверки разной вирулентности провели контрольные опыты с материалом из Франции и Испании (Dussaubat C ea, 2013) поскольку предполагалось, что именно N. ceranae вызывала высокую смертность пчелосемей в Испании (Higes M ea, 2008, 2010), в то время как N. ceranae во Франции приводила лишь к незначительной депопуляции пчелиных семей (Chauzat MP ea, 2007, 2010). Пчелам A. m. iberiensis в возрасте 5-ти дней сводным от паразита индивидуально скармливали по 1 мкл раствора содержавшего 40 000 спор ноземы. Погибших пчел удаляли ежедневно и подсчитывали количество спор. На 12-й день опыта ноземой было поражено почти 100% эпителиальных клеток кишечника, количество спор на пчелу достигло 9 000 000. На 16-й день 100% гибель всех пчел. Если принять цикл развития ноземы равный 3,5 дня (72-96 часов), то за время опыта прошло четыре цикла с увеличением количества спор в 55 раз за цикл. В полевых условиях гибель пчел и ослабление семей будет иметь более ровный характер с переходом к фуражировочной деятельности молодых пчел. В Испании 100% гибель пчел уже через 8 дней после заражения (Higes M ea, 2007) была вызвана начальной дозой в 125 000 спор на пчелу. На 3-й день после заражения было поражено 4,5% эпителия кишечника, на 6-й день уже 66%. Смертность пчел проявлялась уже при 60% поражении эпителия. То есть скорость депопуляции и гибели семей зависит в первую очередь от интенсивности начального заражения (Dussaubat CJ ea, 2012).

Использование ЭМ и прополиса в борьбе с ноземой (в работе)